TMT标记定量蛋白质组学

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介绍

TMT(Tandem Mass Tag)技术是由 Thermo Scientific 公司研发的一种多肽标记技术。通过特异性标记多肽的特定氨基基团,进行串联质谱分析,TMTpro 16plex 同位素标记试剂组可同时比较 16 个不同样品中蛋白质的相对含量,通过搭桥和批次效应处理可实现上百例样本间的蛋白质相对含量比较。TMT标记肽段通常采用 DDA (Data-Dependent Acquisition) 模式采集和可进行深度分级从而提高鉴定深度。

欧米服务

  1. 西湖欧米采用最新 TMTpro 16plex 同位素标记试剂组,通过设计上的优化和批次效应处理,可实现 500 例样本间的蛋白质相对含量的同时比较分析。
  2. 通过进行深度分级(30 Fraction)可以使组织样本中的蛋白定量数量达到 10000+、血液中的蛋白定量数达到1000+。
  3. 结合 PCT 样本前处理技术,可以实现临床微量样本(如 FFPE、穿刺活检、泪液等)的高深度蛋白质定量分析,组织样本最低送样量只需 0.1mg。

质谱仪

Orbitrap Exploris 480

合作项目案例

1、Cell | TMT 高深度分级解析新冠患者不同器官组织 FFPE 样本中的蛋白组特征

FFPE 样本一直是十分重要的临床样本资源,但由于其样本量较少难以开展蛋白组学研究。该研究借助 PCT 微量样本前处理技术和 TMT 标记定量技术,在 19 名 COVID-19 患者和 56 名通过手术感染其他疾病的非 COVID-19 病例的 7 种不同器官组织的 218 个FFPE样本中,量化了 11394 种蛋白质。

 

2、Cell discovery | 血液样本高深度蛋白组学揭示新冠 omicron 变异株感染宿主的血液蛋白组特征

该研究借助深度分级 TMT 标记定量蛋白组学在 79 例血液样本中共定量到 1464 个蛋白质,缺失值过滤后还剩 1155 个蛋白,并对其中 751 种蛋白进行了功能分析,评估了受奥密克戎变异株感染的非重症患者的血液蛋白组特征,以及新冠疫苗接种对奥密克戎变异株感染发挥保护作用的分子特征。

参考文献

1. Li, et al, TMTpro reagents: a set of isobaric labeling mass tags enables simultaneous proteome-wide measurements across 16 samples. Nature Methods. 2020. (17): 399-404.

2. Shen, et al. Proteomic and Metabolomic Characterization of COVID-19 Patient Sera. Cell. 2020. 182(1): 59-72.

3. Nie, et al. Multi-organ Proteomic Landscape of COVID-19 Autopsies. Cell. 2021 Feb.184(3): 775-791.

4. Zhu, et al. Snapshot: Clinical proteomics. Cell. 2021.184(18): 4840-4840.

5. Bi, et al. Proteomic and metabolomic profiling of urine uncovers immune responses in COVID-19. Cell Reports. 2021. 38(3)

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